ABO血型鑒定,即指ABH血型抗原的檢測(cè)。紅細(xì)胞含A抗原的叫A型,含B抗原的叫B型,含A和B抗原的叫AB型;不含A、B抗原,而含H抗原的稱O型。
ABO血型鑒定的方法有以下三種:
是紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)抗體在凝膠微柱介質(zhì)中發(fā)生凝集反應(yīng)的免疫學(xué)方法。血型抗體為單克隆抗體,加入試劑、標(biāo)本,用離心機(jī)離心后可直接用肉眼觀察結(jié)果或用血型儀分析。此法操作標(biāo)準(zhǔn)化,定量加樣,確保結(jié)果準(zhǔn)確性。
二、抗A、抗B和抗AB標(biāo)準(zhǔn)血清標(biāo)準(zhǔn)
準(zhǔn)血清均采自健康人,并應(yīng)符合下述條件:
1、特異性:只能與相應(yīng)的紅細(xì)胞抗原發(fā)生凝集,無非特異性凝集。
2、效價(jià):我國標(biāo)準(zhǔn)抗A和抗B血清效價(jià)均在1:128以上。
3、親和力:我國標(biāo)準(zhǔn)要求抗A對(duì)A1、A2及A2B發(fā)生反應(yīng)開始出現(xiàn)凝集的時(shí)間分別是15s、30s和45s;抗B對(duì)B型紅細(xì)胞開始出現(xiàn)凝集的時(shí)間為15s。凝集強(qiáng)度為3min時(shí),凝塊不小于1mm2。
4、冷凝集素效價(jià):在1:4以下。
5、無菌。
6、滅活補(bǔ)體。
三、生理鹽水凝集法
1、玻片法:操作簡(jiǎn)單,適于大量標(biāo)本檢查,但反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng);被檢查者如血清抗體效價(jià)低,則不易引起紅細(xì)胞凝集,因此,不適于反向定型。
2、試管法:由于離心機(jī)的離心作用可加速凝集反應(yīng),故反應(yīng)時(shí)間短,而且,借助于離心機(jī)可以使紅細(xì)胞接觸緊密,促進(jìn)凝集作用,適于急診檢查。
紅細(xì)胞亞型抗原性弱,如抗A抗B標(biāo)準(zhǔn)血清效價(jià)低時(shí),易造成漏檢或誤定。如加用O型(抗A、B)血清和反向定型,可避免此類錯(cuò)誤。
玻片法凝集結(jié)果判斷:紅細(xì)胞呈均勻分布,無凝集顆粒,鏡下紅細(xì)胞分散。
在低倍鏡下凝集程度強(qiáng)弱判斷標(biāo)準(zhǔn):
①呈一片或幾片凝塊,僅有少數(shù)單個(gè)游離紅細(xì)胞為(++++)。
②呈數(shù)個(gè)大顆粒狀凝塊,有少數(shù)單個(gè)游離紅細(xì)胞為(+++)。
③數(shù)個(gè)小凝集顆粒和一部分微細(xì)凝集顆粒,游離紅細(xì)胞約占1/2為(++)。
④肉眼可見無數(shù)細(xì)沙狀小凝集顆粒。于鏡下觀察,每凝集團(tuán)中有5~8個(gè)以上紅細(xì)胞凝集為(+)。
⑤可見數(shù)個(gè)紅細(xì)胞凝集在一起,周圍有很多的游離紅細(xì)胞(±)。
⑥可見極少數(shù)紅細(xì)胞凝集,而大多數(shù)紅細(xì)胞仍呈分散分布為混合凝集外觀。
⑦鏡下未見細(xì)胞凝集,紅細(xì)胞均勻分布為(-)。