組織經(jīng)酶解消化后游離出來(lái),細(xì)胞的表面通常很脆,易于破裂,分離過(guò)程中要盡可能使細(xì)胞處于懸浮狀態(tài),如處于梯度的屏障層上。如果細(xì)胞經(jīng)離心形成沉淀,在重懸過(guò)程中由于剪切作用對(duì)細(xì)胞可能會(huì)有不同程度的損傷。在采用漂浮法分離時(shí),都會(huì)應(yīng)用蛋白水酶解,例如胰蛋白酶、膠原酶等。在隨后的清洗過(guò)程中這些酶未能*從游離細(xì)胞中清除,它們會(huì)對(duì)細(xì)胞繼續(xù)作用,所以有時(shí)在4℃下分離,其作用是抑制這些酶的活性。
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